Sr. Editor. El género Rickettsia incluye bacterias del phylum Proteobacteria, de la subclase a-1 del orden Rickettsiales. Tradicionalmente, este género se divide en dos grandes clados: el grupo del tifo (GT) que incluye a Rickettsia typhi y Rickettsia prowazekii transmitidas por pulgas y piojos, y el grupo de las fiebres manchadas (GFM) que incluye más de 20 especies, entre ellas Rickettsia rickettsii, principalmente transmitidas por garrapatas «duras». Estas bacterias se caracterizan por ocasionar infección emergente o reemergente (según la especie que infecta) en personas y animales alrededor del mundo, conocidas como enfermedades rickettsiales o rickettsiosis ¹1. Oteo JA, Nava S, Sousa Rd, Mattar S, Venzal JM, Abarca K, et al. Guías Latinoamericanas de la RIICER para el diagnóstico de las rickettsiosis transmitidas por garrapatas. Rev Chilena Infectol. 2014;31(1): 54-65. Doi: 10.4067/S0716-10182014000100009.
https://doi.org/10.4067/S0716-1018201400... . En el sureste de México han sido reportadas varias especies de Rickettsia en personas, animales y ectoparásitos de numerosas especies ²2. Sánchez-Montes S, Colunga-Salas P, Lozano-Sardaneta YN, Zazueta-Islas HM, Ballados-González GG, Salceda-Sánchez B, et al. The genus Rickettsia in Mexico: Current knowledge and perspectives. Ticks Tick Borne Dis. 2021;12(2): 101633. Doi: 10.1016/j.ttbdis.2020.101633.
https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2020.10... , por lo que se considera una zona endémica y un «punto caliente» para estas bacterias. El objetivo del presente estudio fue describir la frecuencia de ADN de Rickettsia spp. en habitantes asintomáticos de una comunidad rural del sureste de México e identificar las especies involucradas en la infección a través del uso de análisis bioinformáticos.

Esta investigación fue aprobada por el Comité de Ética en Investigación del Centro de Investigaciones Regionales «Dr. Hideyo Noguchi», Universidad Autónoma de Yucatán (acta: CEI-007-2018). Adicionalmente, para la toma de muestras biológicas y resguardo de datos personales, se consideraron los estatutos de la Asamblea Médica Mundial de Helsinki y del Código Internacional de Ética Médica.

De marzo a abril de 2018 se trabajó con 128 habitantes (asintomáticos) de Maxcanú, Yucatán, México. A cada uno se les recolectó sangre periférica (5 mL en adultos, 3 mL en niños) en tubos BD-Vacutainer® con anticoagulante (EDTA-K2) y se conservó en una nevera con refrigerantes para su traslado al laboratorio. Las muestras se centrifugaron (15 000 revoluciones por minuto durante 15 minutos a 24 °C) para recolectar el paquete de glóbulos blancos que sirvió en la extracción de ADN total realizada con el kit QIAamp DNA Mini Kit® (QIAGEN®), protocolo «DNA Purification from liquits and fluids». Las muestras de ADN extraídos fueron evaluados en un espectrofotómetro NanoDrop-2000® (Thermo Scientific®) para determinar su concentración y pureza.

Para identificar ADN de Rickettsia en las muestras sanguíneas se realizaron dos PCR, una anidada y otra semianidada múltiple, dirigidas a la detección de los genes 17kDa y sca5, respectivamente, utilizando las metodologías descritas previamente ³3. Torres-Castro M, Reyes-Novelo E, Noh-Pech H, Tello-Martín R, Lugo-Caballero C, Dzul-Rosado K, et al. Personal and household factors involved in recent Rickettsia exposure in a rural population from Yucatán, Mexico. Zoonoses Public Health. 2020;67(5): 506-515. Doi: 10.1111/zph.12714.
https://doi.org/10.1111/zph.12714... . En todas las reacciones se consideraron controles positivos (ADN de Rickettsia conorii) y negativos (agua estéril). La electroforesis de los productos de ambas PCR se realizó en geles de agarosa (1%) teñidos con bromuro de etidio (8%).

Los amplificados de sca5 (no se consideraron amplificados de 17kDa) con los tamaños esperados (420 y 230 pares de bases para R. rickettsii y R. typhi, respectivamente) se purificaron con el kit Gel DNA Recovery (ZymocleanTM®) según las especificaciones estandarizadas, y se enviaron al laboratorio DIMYGEN® (Mérida, México) para su secuenciación (sentido y antisentido) por el método Sanger. Las secuencias obtenidas fueron editadas y alineadas con el software MEGA versión 7.0® (https://www.megasoftware.net/), y posteriormente comparadas, utilizando el algoritmo Megablast, con secuencias parciales de sca5 pertenecientes a Rickettsia, previamente depositadas en GenBank (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi), para conocer sus porcentajes de identidad y cobertura.

Se identificó ADN de Rickettsia en 34,4% (44/128) de las muestras sanguíneas. Los resultados del análisis en GenBank arrojaron lo indicado en la Tabla 1. Como puede confirmarse, siete secuencias presentaron identidad y cobertura para R. rickettsii y dos para R. typhi.

Se han reportado casos aislados de infección con R. typhi⁴4. Zavala-Castro JE, Zavala-Velázquez JE, Sulú Uicab JE. Murine typhus in child, Yucatan, Mexico. Emerg Infect Dis. 2009;15(6): 972-974. Doi: 10.3201/eid1506.081367.
https://doi.org/10.3201/eid1506.081367... ^,55. Martínez-Ortiz D, Torres-Castro M, Koyoc-Cardeña E, López K, Panti-May A. Detección molecular de Rickettsia typhi en perros de una comunidad rural de Yucatán, México. Biomedica. 2016;36(Supl.1):45-50. Doi: 10.7705/biomedica.v36i2.2913.
https://doi.org/10.7705/biomedica.v36i2.... y R. rickettsii⁶6. Zavala-Castro JE, Dzul-Rosado KR, León JJ, Walker DH, Zavala-Velázquez JE. An increase in human cases of spotted fever rickettsiosis in Yucatan, Mexico, involving children. Am J Trop Med Hyg. 2008;79(6): 907-910. en habitantes y animales de Yucatán; no obstante, los hallazgos presentados son importantes debido a que se evidencia la infección (bacteriemia) con dos especies de Rickettsia en una misma población estudiada de asintomáticos, lo que representa avances en el estudio epidemiológico y el abordaje clínico de casos de rickettsiosis en el sureste de México. Los cambios en el nicho ecológico, la circulación continua de vectores (garrapatas y pulgas), la presencia de reservorios (animales) y hospederos accidentales (humanos) que mantienen los ciclos de transmisión de las distintas especies de Rickettsia²2. Sánchez-Montes S, Colunga-Salas P, Lozano-Sardaneta YN, Zazueta-Islas HM, Ballados-González GG, Salceda-Sánchez B, et al. The genus Rickettsia in Mexico: Current knowledge and perspectives. Ticks Tick Borne Dis. 2021;12(2): 101633. Doi: 10.1016/j.ttbdis.2020.101633.
https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2020.10... ^,33. Torres-Castro M, Reyes-Novelo E, Noh-Pech H, Tello-Martín R, Lugo-Caballero C, Dzul-Rosado K, et al. Personal and household factors involved in recent Rickettsia exposure in a rural population from Yucatán, Mexico. Zoonoses Public Health. 2020;67(5): 506-515. Doi: 10.1111/zph.12714.
https://doi.org/10.1111/zph.12714... en Yucatán, podrían estar asociados al presente reporte.

Dentro de las limitaciones del estudio puede mencionarse que se enviaron a secuenciación únicamente nueve productos positivos, lo cual pudo limitar la identificación de más especies de Rickettsia involucradas en la infección. Otra limitante es la falta de seguimiento clínico y la subsecuente generación de datos en las personas positivas a la presencia de ADN de Rickettsia. Estos datos son relevantes para mejorar el abordaje y diagnóstico de las rickettsiosis en Yucatán.

Se encontraron dos especies de Rickettsia en personas asintomáticas del sureste de México. Se recomienda realizar vigilancia activa y control de vectores (garrapatas y pulgas) para reducir el riesgo de transmisión de Rickettsia en los habitantes y animales domésticos de las comunidades de Yucatán ³3. Torres-Castro M, Reyes-Novelo E, Noh-Pech H, Tello-Martín R, Lugo-Caballero C, Dzul-Rosado K, et al. Personal and household factors involved in recent Rickettsia exposure in a rural population from Yucatán, Mexico. Zoonoses Public Health. 2020;67(5): 506-515. Doi: 10.1111/zph.12714.
https://doi.org/10.1111/zph.12714... , así como realizar estudios para un mejor conocimiento de los protagonistas del ciclo de las rickettsiosis y disminuir la incidencia de estas enfermedades en el sureste de México.

Agradecimientos:

a Karina López-Ávila, Raúl Tello-Martín, Iris Trinidad Martínez y Ana Rejón-Magaña, por su apoyo en la toma de muestras biológicas. Enrique Reyes Novelo agradece al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT) de México (50012).

Referencias bibliográficas

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