Transmisión materno-fetal de Trypanosoma cruzi, un problema de salud poco estudiado en México: caso Chiapas

Maternal-fetal transmission of Trypanosoma cruzi, a health problem slightly studied in Mexico: case Chiapas

Guillermina Campos-Valdez Luis Miguel Canseco-Ávila Fernando González-Noriega Oscar Alfaro-Zebadua Ismael Yadird Nava-Medecigo Enedina Jiménez-Cardoso Acerca de los autores

Resumen:

Objetivo:

Determinar la prevalencia de infección de Trypanosoma cruzi en 1 125 mujeres embarazadas y la frecuencia con que éstas la transmiten a sus hijos en Tapachula y Palenque, Chiapas.

Material y métodos:

Se determinó la prevalencia materna por serología, la frecuencia de transmisión por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y la capacidad reactiva a T. cruzi a los 12 meses de edad del niño.

Resultados:

La prevalencia materna total fue 23/1 125 (2.04%); 9/600 (1.5%) en Tapachula y 14/525 (2.6%) en Palenque. Las mujeres seropositivas tenían entre 20 y 35 años; 31.8% tuvo ruptura prematura de membrana (RPM) y 9.1% tuvo antecedentes de muerte perinatal. La frecuencia de transmisión materno-fetal en Tapachula fue de 2/9(22.2%) y en Palenque de 1/14(7.14%); todos los niños positivos eran asintomáticos.

Conclusión:

La tasa de transmisión materno-fetal en el estado de Chiapas es variable; la razón podría ser el estado inmunológico de la madre o la cepa de T. cruzi.

Palabras clave:
Trypanosoma cruzi; enfermedad de Chagas; México

Abstract:

Objective:

To determine the Trypanosoma cruzi infection prevalence in 1125 pregnant women and the transmission frequency to their children from Tapachula and Palenque, Chiapas.

Materials and methods:

We determined the prevalence by serology tests and the transmission frequency by polymerase chain reaction (PCR) and T. cruzi reactivity capacity after 12 months.

Results:

Total maternal infection prevalence were 23/1 125 (2.04%), 9/600 (1.5%) were from Tapachula and 14/525 (2.6%) from Palenque. The seropositive women were between 20 and 35 years old, 31.8% have Premature Rapture of Membrane and 9.1% have history of perinatal death. The total percentage of positive newborns by PCR was 9/23 (39.13%), out of those 2/9 (22.2%) are from Tapachula and 7/14 (50%) from Palenque. The Maternal Fetal transmission frequency was. 2/9 (22.2%) in Tapachula and 1/14 (7.14%) in Palenque, all positive infants were asynthomatic.

Conclusion:

The maternal-fetal transmission rate in Chiapas State is variable; the reason could be the maternal immunological status and T. cruzi strain.

Keywords:
Trypanosoma cruzi; Chagas' disease; Mexico

La enfermedad de Chagas es una de las parasitosis olvidadas que cada día cobran mayor importancia en México. Debido a la falta de programas en el control del vector, a la ausencia de métodos específicos de diagnóstico y a la falta de estrategias para la búsqueda de recién nacidos infectados, el número de personas infectadas va en aumento.11. Cusnalder MC, Gómez RD, Amat LI, Aguiló F, Henández A, Laila JM. Chagas Congénito, ¿es posible en España? Ginecología y Obstetricia Clínica 2004;5:198-203.

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-1212. Guzmán BC, La Huerta S, Velasco CO. Chagas disease. First congenital case report. Arch Med Res 1998;29:195-196. Recientemente, un estudio llevado a cabo en Oaxaca y Jalisco mostró seroprevalencia materna de 4.4 y 12.02%, respectivamente, y cinco casos de transmisión congénita: tres en Oaxaca (9.1%) y dos en Jalisco (3.07%);1313. Jiménez CE, Campos VG, Cortes CA, de la Luz SR, Mendoza CR, Hernández AP, et al. Maternal fetal transmission of Trypanosmoma cruzi: a problem of public health little studied in México. Exp Parasitol 2012;131:425-432. http://doi.org/bdwn
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todos ellos asintomáticos y diagnosticados por serología. Estudios realizados en América del Sur77. Apt W, Zulantay I, Solari A, Ortiz S, Oddo D, Corral G, et al. Vertical transmission of Trypanosoma cruzi in the province of Choapa, IV Region, Chile: preliminary report (2005-2008). Biol Res 2010;43:269-274. http://doi.org/bs5988
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mostraron que las mujeres con infección crónica sintomática son portadoras de la infección y presentan riesgo repetido de infectar al feto en embarazos subsecuentes, múltiples abortos por la ruptura prematura de membranas y, en casos graves, la presencia de óbitos. Los signos más importantes encontrados en los recién nacidos infectados son bajo peso y talla al nacer, Apgar <7, síndrome de estrés respiratorio y daño cardiaco, hepático o renal. Los casos encontrados en México son asintomáticos:1313. Jiménez CE, Campos VG, Cortes CA, de la Luz SR, Mendoza CR, Hernández AP, et al. Maternal fetal transmission of Trypanosmoma cruzi: a problem of public health little studied in México. Exp Parasitol 2012;131:425-432. http://doi.org/bdwn
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las madres con infección crónica no presentan síntomas severos, probablemente debido al tipo de linaje de T. cruzi (IIa) que se encuentra en el país y que se ha aislado de personas infectadas.66. Rassi A, Amato NV, Rassi GG, Amato VS, Rossi JA, LuquettiA O, et al. A retrospective search for maternal transmission of Chagas infection from patients in the chronic phase. Rev Soc Bras Med Trop 2004;37:485-489. http://doi.org/dq94wc
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Éste difiere del linaje que se encuentra en Sudamérica, el cual ocasiona síntomas de leves a severos, hasta llegar a la muerte.

El propósito de este estudio fue determinar la prevalencia de infección con T. cruzi en 1 125 mujeres embarazadas de dos zonas geográficas del estado de Chiapas, la frecuencia de transmisión a sus hijos y los factores asociados con el riesgo de infección.

Material y métodos

Población

Durante el periodo de marzo de 2012 a noviembre de 2014 se estudió a un total 1 125 mujeres embarazadas con más de 32 semanas de gestación y a sus recién nacidos, en dos hospitales ubicados en el estado de Chiapas: Hospital General de Tapachula y Hospital Regional de Palenque. El tamaño de la muestra se calculó tomando en cuenta el número de partos atendidos por año en cada hospital y la prevalencia reportada en bancos de sangre, ya que no se tienen reportes para la transmisión congénita. La prevalencia de transmisión esperada fue de 1.6%. Se incluyeron todas aquellas mujeres gestantes que aceptaron participar, para lo cual firmaron una carta de consentimiento informado, aprobada por el Comité de Bioética del Hospital Infantil de México "Federico Gómez".

Datos demográficos, clínico-obstétricos de las madres y somatometría de sus recién nacidos

Las madres fueron sometidas a un cuestionario para obtener sus datos generales: nombre, edad, dirección, lugar de nacimiento y procedencia. Para determinar posibles factores de riesgo, se tomó en cuenta la siguiente información epidemiológica y obstétrica: conocimiento del vector-transmisor, presencia del vector-transmisor en su domicilio (se tomó en cuenta la captura intra y peridomiciliar del vector, así como la búsqueda del parásito en heces), número de transfusiones sanguíneas recibidas, número de gestaciones, resolución de los embarazos y semanas de gestación por fecha de última menstruación (FUM). En el cuestionario sobre los recién nacidos se incluyeron los siguientes datos antropométricos: fecha de nacimiento, sexo, edad por test de Capurro,1414. Capurro H, Konichezky S, Fonseca D, Caldeyro BR. A simplified method for diagnosis of gestational age in the newborn infant. J Pediatr 1978;93:120-122. http://doi.org/bg8kbp
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resolución del embarazo, valoración Apgar,1515. Kumari S, Sharma M, Yolav M, Sarof A, Kabra M, Mehra R. Trends in neonatal autome with low Apgar Scores. Indian J Pediatr 1993;60(3):415-422. http://doi.org/b3cxmk
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,1616. Haynes AB, Regenbogen SE, Weiser TG, Lipsitz SR, Dziekan G, Berry WR, et al. Surgical outcome measurement for a global patient population: Validation of the surgical Apgar Score in 8 countries. Surgery 2011;149:519-524. http://doi.org/bbmsr6
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datos de somatometría (peso, talla y perímetro cefálico) y presencia de alteraciones en hígado, corazón o digestivas. A las madres se les comunicó que sus bebés podrían ser reexaminados en un futuro en dependencia del resultado.

Determinación de anticuerpos anti-T. cruzi en las madres, por dos pruebas serológicas

Se tomó una gota de sangre venosa (15 μL) del dedo medio de la mano de la madre y se determinó la presencia de anticuerpos en suero con el estuche comercial Chagas Stat-Pak.**Chembio Diagnostic Systems, Inc, IBM Company, SDSS Statistics, versión 22, México, 2013. Sólo en casos en los que la prueba resultó positiva (presencia de una banda púrpura antes de 15 min.), se tomaron 4 mL de sangre venosa por punción de la vena del brazo para determinar la presencia de anticuerpos anti-T. cruzi con una ELISA de tercera generación con antígeno recombinante.‡Accutrack, S.A. de C.V. La prueba se consideró positiva cuando el valor de la densidad óptica. de la muestra fue mayor al valor del punto de cohorte, el cual se determinó de acuerdo con las especificaciones del provedor1717. Chippaux JP, Santalla JA, Postigo JR, Romero M, Salas CNA, Schneider D, et al. Sensitivity and specificity of Chagas Stat-Pak(r) test in Bolivia. Trop Med Int Health 2009;14:732-735. http://doi.org/ddhfqx
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18. da Silveira FJ, Umezawa SE, Luquetti AO. Chagas disease: recombinant Trypanosoma cruzi antigens for serological diagnosis. Trends Parasitol 2001;17:286-291. http://doi.org/dkzfzg
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-1919. Jiménez CE, Campos VG, Castellanos PR, Romero P, Morales AE. PCR and specific antibodies to Trypanosoma cruzi in blood donors at the central blood bank from Centro Medico Nacional de Occidente (IMSS), Guadalajara, Jalisco, México. Bioquímia 2000;25:99-104.

Determinación del DNA del T. cruzi en sangre de cordón umbilical por PCR

Se extrajo DNA a partir de 300 μl de sangre de cordón umbilical por un método comercial,**Wizar Genomic DNA Purification Kit. de acuerdo con las especificaciones del proveedor. Para la PCR, la mezcla de reacción se llevó a un volumen final de 25 μL con: PCR Master mix 2X (1.5 U Taq DNA polimerasa resuspendida en su amortiguador de reacción a pH 8.5, 10 μM de cada dNTPs y 75 μM MgCl2; Promega), 0.5 μM de los iniciadores Tcz11. Cusnalder MC, Gómez RD, Amat LI, Aguiló F, Henández A, Laila JM. Chagas Congénito, ¿es posible en España? Ginecología y Obstetricia Clínica 2004;5:198-203. y Tcz2, que amplifican una región muy conservada y repetida del nDNA de T. cruzi2020. Virreira M, Torrico F, Truyens C, Alonso VC, Solano M, Carlier Y, et al. Comparison of Polymerase Chain Reaction Methods for reliable and easy detection of congenital Trypanosoma cruzi infection. Am J Trop Med Hyg 2003;68:574-582. y 300 ng del DNA. El programa de amplificación fue el siguiente: 35 ciclos de 94 °C durante 50 segundos, 54 °C durante 50 segundos y 72 °C durante 50 segundos, seguido por un paso de extensión final de 72 °C durante 5 minutos. Se incluyeron los siguientes controles: el DNA de una persona con serología negativa a la enfermedad de Chagas, el DNA de una persona con Chagas crónico y el DNA de epimastigotes de T. cruzi, así como los controles de reactivos. Se consideró positivo cuando se obtuvo un producto de amplificación de 200 pb, el cual se observó en geles de agarosa a 2% con bromuro de etidio 0.5 μg/mL.

Determinación de la transmisión materno-fetal de T. cruzi en niños positivos a PCR, por serología después de un año

Se solicitó el permiso del tutor (padre o madre) para tomar una segunda muestra de sangre (5 mL) en los niños positivos por PCR después de un año de nacidos y buscar la presencia de anticuerpos anti-T. cruzi por dos pruebas serológicas: Chagas Stat-Pak y ELISA, siguiendo las especificaciones del proveedor. Se consideró positivo al niño con reactividad para ambas pruebas.

Análisis estadístico y correlación

Se calculó la seroprevalencia materna (número de mujeres reactivas a dos pruebas serológicas/número total de mujeres incluidas) y la frecuencia de la transmisión materno-fetal (número de niños con serología positiva después de un año de nacido/el número de recién nacidos de mujeres reactivas a dos pruebas serológicas X 100).

Se empleó la prueba exacta de Fisher para determinar la significancia entre los resultados de las mujeres seropositivas y los de las seronegativas, así como entre los niños positivos y los negativos, empleando el valor de la media o el porcentaje (p<0.05). Además, los datos obstétricos de las madres y los antropométricos de los recién nacidos fueron evaluados con la prueba F, para determinar la asociación de los parámetros con la frecuencia de transmisión de T. cruzi.2121. Dawson SB, Trapp RG. Bioestadistica médica. 2a ed. México: Manual Moderno, 2004.

Tratamiento

Los niños reactivos por serología fueron tratados durante 30 días con Nifurtimox**Lampid. con la dosis recomendada para neonatos e infantes (10-15 mg/kg/día, divididos en dos subdosis orales) en el hospital de origen. Las madres seroreactivas fueron tratadas con Lampid 1015 mg/kg/día en una sola dosis durante 60 días. Las dosis fueron proporcionadas por el médico general en el hospital de origen.1313. Jiménez CE, Campos VG, Cortes CA, de la Luz SR, Mendoza CR, Hernández AP, et al. Maternal fetal transmission of Trypanosmoma cruzi: a problem of public health little studied in México. Exp Parasitol 2012;131:425-432. http://doi.org/bdwn
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,2222. Ramsey JM, Ordoñez R, Cruz CA, Alvear AL, Chavez V, Lopez R, et al. Distribution of domestic triatominae and stratification of Chagas Disease transmission in Oaxaca, Mexico. Med Vet Entomol 2000;14:19-30.

Resultados

De 1 125 binomios mujer-recién nacido, 600 fueron del Hospital Regional de Tapachula, ubicado en la región del Soconusco en la costa sur del estado y 525 del Hospital General de Palenque, ubicado al noreste del estado de Chiapas.

La relación entre la serología positiva y negativa de la madre con los parámetros clínicos y obstétricos que presentaron significancia estadística se muestran en el Cuadro I. Como se observa, la edad promedio, número de gestaciones, abortos, óbitos y RPM mostraron significancia estadística al comparar la población de mujeres seroreactivas con la de no reactivas, sólo para el municipio de Palenque. En Tapachula ninguno de los parámetros estudiados tuvo significancia. De las mujeres seropositivas, 59.1% presenta una edad promedio entre 20 y 35 años con un valor de p<0.05. Es probable que hayan adquirido la infección en la primera etapa de su vida y que en la actualidad se encuentren en estadio crónico con títulos altos de anticuerpos IgG. El porcentaje de óbitos fue diez veces mayor en las mujeres seropositivas en relación con las seronegativas; se obtuvo una significancia de p<0.05 por la prueba F. Se infiere que la causa de muerte de los fetos de estas mujeres fue la infección con T. cruzi; sin embargo, esto no se pudo comprobar.

Cuadro I
Relación entre la serología materna y los datos clínico-obstétricos con significancia estadística. Chiapas, México, marzo 2012-noviembre 2014

De las mujeres seropositivas, 31.8% presentó ruptura prematura de membranas, en contraste con 11.9% de madres seronegativas. Aunque existen diferencias estadísticamente significativas, no podemos afirmar que esto ocurra por efecto de la infección con T. cruzi, ya que se da por múltiples causas.

El tiempo de residencia, la edad gestacional y la administración de transfusiones sanguíneas podrían ser los factores de riesgo de mayor importancia epidemiológica. Sin embargo, no se observó significancia estadística en ninguno de los dos municipios. Se encontró que 90.9% de las madres infectadas presentó embarazos a término y que 99.4% no había recibido transfusiones de sangre. Así, la edad gestacional y las transfusiones sanguíneas no presentaron asociación con la infección por T. cruzi; por lo tanto, no podemos considerarlas un factor de riesgo para la infección.

En el Cuadro II se presentan los datos de somatometría de los recién nacidos de madres seropositivas y seronegativas a T. cruzi. Se observa que los valores obtenidos en ambas poblaciones de niños se encuentran dentro de los valores normales. Además, ninguno presentó alteraciones digestivas o hepáticas al nacer; todos eran asintomáticos.

Cuadro II
Relación entre la somatometría de los recién nacidos y la serología materna.* Chiapas, México, marzo 2012-noviembre 2014

En relación con la seroprevalencia materna a la infección con T. cruzi, el porcentaje de gestantes seroreactivas fue mayor en el municipio de Palenque, aunque el tamaño de muestra fue mayor que en Tapachula (Cuadro III).

Cuadro III
Relación entre la serología materna y la transmisión neonatal. Chiapas, México, marzo 2012-noviembre 2014

Los resultados de PCR de los recién nacidos de mujeres seropositivas a T. cruzi fueron analizados por municipios. En Tapachula, de las nueve mujeres seroreactivas a ambas pruebas, dos niños (22.2%) presentaron el producto de amplificación de 200 pb específica de una región del DNA nuclear de T. cruzi. En Palenque, la cantidad fue de siete niños (50%) de 14 mujeres serorreactivas a ambas pruebas. La frecuencia total de positivos fue de nueve niños (39.13%), hijos de 23 mujeres seroreactivas a ambas pruebas. Sin embargo, la prueba sólo determinó el DNA del parásito, pero no se sabe si éste se encuentra vivo o muerto. Por lo tanto, es necesario determinar la presencia de infección por la búsqueda de anticuerpos propios del infante (Cuadro IV).

Cuadro IV
Serología neonatal y transmisión congénita. Chiapas, México, marzo 2012-noviembre 2014

En la determinación de anticuerpos anti-T. cruzi en el suero de los niños positivos a PCR se encontró que la frecuencia de transmisión materno-fetal de T. cruzi total fue de tres niños seroreactivos (13.04%) nacidos de 23 mujeres seroreactivas a ambas pruebas. De éstos, dos niños (22.2%) son de Tapachula y uno (7.14%), de Palenque (Cuadro III).

Discusión

La prevalencia de la enfermedad de Chagas congénita en el estado de Chiapas no está reportada; sólo se tienen registros de la población en general y en donadores de sangre. Este estudio demostró que la transmisión materno-fetal de T. cruzi en el estado es un problema de salud porque puede provocar consecuencias severas en el desarrollo y sobrevida de los niños infectados asintomáticos, quienes no son identificados al nacer pero que en la adolescencia pueden desarrollar la etapa crónica de la enfermedad y experimentar mala calidad de vida. La importancia del diagnóstico oportuno radica en la administración temprana del tratamiento específico, con lo cual es posible lograr que estos niños infectados asintomáticos se curen y su pronóstico de vida sea favorable. Los resultados muestran que la prevalencia materna total fue mayor a la esperada (2.04%), con variación entre la zonas geográficas. En Palenque, la seroprevalencia materna fue mayor que en Tapachula y las mujeres infectadas presentaron indicadores demográficos y obstétricos que sugieren la presencia de infección, así como la posible transmisión del parásito por la vía placentaria. En Palenque, la edad de las mujeres seropositivas mostró significancia frente a la edad de las mujeres no reactivas, pero sin presentar sintomatología específica de la enfermedad de Chagas. En un estudio reciente2323. Bem C, Verastegui M, Gilman RH, Lafuente C, Galdos CG, Calderon M, et al. Congenital Trypanosoma cruzi Transmission in Santa Cruz, Bolivia. Clin Infect Dis 2009;49:1667-1674. http://doi.org/bstgh8
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se publicó que la prevalencia incrementa con la edad materna, principalmente en las mujeres mayores de 20 años, y que el riesgo de contraer la infección con T. cruzi está directamente relacionado con las zonas de alta endemia.

Otros indicadores significativos fueron el número de embarazos previos, abortos, número de óbitos, la presencia continua de ruptura prematura de membranas y los nacimientos prematuros. En Palenque, estos parámetros mostraron significancia estadística; no así en Tapachula en donde no se observaron diferencias. Al respecto, Bittencourt menciona que los factores maternos que se han implicado en el riesgo de transmisión son el estadio de infección materna y la historia obstétrica.2424. Bittencourt AL. Possible risk factors for vertical transmission of Chagas' disease. Rev Inst Med Trop of Sau Paulo 1992;34:403-408. http://doi.org/bm7tkx
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En relación con la frecuencia de transmisión, los resultados muestran que no todas las mujeres seroreactivas transmiten el parásito y que, aunque la seroprevalencia materna fue mayor en Palenque, la transmisión fue menor. Probablemente, esto se deba a que en este grupo de mujeres, el título de anticuerpos en suero fue tan alto que transmitieron los anticuerpos a sus recién nacidos y con ello protección contra el parásito.

Se ha descrito que las madres infectadas pueden transmitir el parásito en uno, algunos o todos sus embarazos; la causa es desconocida. Además, se ha observado que en las madres no transmisoras, la activación de la inmunidad innata durante el embarazo contribuye con la limitación de la presencia y severidad de la infección congénita en el niño.2525. Torrico F, Alonso VC, Suarez E, Rodríguez P, Torrico MC, Dramaix M, et al. Nivel de endemia de la infección por Trypanosoma cruzi en el lugar de residencia de la madre y desarrollo de la enfermedad de Chagas congénita en Bolivia. Rev Soc Bras Med Trop 2005;38:17-20.

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Es de suponerse que la variabilidad obtenida entre los resultados de Tapachula y Palenque podría estar relacionada con el tipo de cepa de T. cruzi presente en las regiones estudiadas. Se sabe que T. cruzi está dividida en unidades de tipificación discreta (DTU, por sus siglas en ingles): T. cruzi I (TcI) y T. cruzi No TcI (II-VI). En México y América Central, TcI es predominante; no así en América del Sur, donde predomina No-TcI.2929. Cevallos AM, Hernández R. Chagas' disease: pregnancy and Congenital Transmission. Biomed Res Int 2014:401864. http://doi.org/bdwq
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Es probable que el paso de inmigrantes sudamericanos infectados a través del estado de Chiapas, específicamente por Palenque, pueda estar relacionado con los resultados obtenidos en esta región, ya que se ha sugerido que la transmisión congénita de T. cruzi está relacionada con el tipo de cepa del parásito.2929. Cevallos AM, Hernández R. Chagas' disease: pregnancy and Congenital Transmission. Biomed Res Int 2014:401864. http://doi.org/bdwq
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En este estudio, así como en uno previo realizado en Oaxaca, Jalisco y el Distrito Federal, todos los niños infectados fueron asintomáticos. Las manifestaciones clínicas tal vez se puedan presentar semanas o meses después del nacimiento. Éste fue el caso de tres niños de Palenque que nacieron de madres seroreactivas y fueron negativos por PCR, dos de los cuales fallecieron a los dos meses. El tercero se encuentra con una sintomatología característica de enfermedad de Chagas crónica; sin embargo, no se le ha proporcionado el medicamento ya que sus familiares cambiaron de localidad. Este fenómeno de migración es uno de los principales problemas en el municipio de Palenque; la situación de extrema pobreza y rezago en salud provoca que la gente migre constantemente en busca de mejores ofertas de trabajo, lo que a su vez ocasiona la migración de las personas infectadas y la dispersión de la enfermedad.

Conclusión

En este trabajo se demuestra la necesidad de establecer una estrategia metodológica que sirva para identificar a todos los neonatos infectados nacidos de madres con serología positiva para T. cruzi o parasitemia detectable. La PCR como prueba diagnóstica determina el DNA del parásito, pero no el parásito completo y, para decir que es infección, el parásito vivo debe infectar el organismo del niño y producir anticuerpos. Por esta razón se requiere incluir pruebas serológicas para el diagnóstico.

Agradecimientos

A la QFB Berenice Aburto Rojas, por su valiosa participación en la toma de muestras, recolección de datos y desarrollo de la metodología. Este trabajo le sirvió para realizar su tesis de licenciatura.

Al Dr. Miguel Angel Medina Hernández y a la MC Mary Carmen Ibarra Mejía, de la Cordinación de Salud Pública de Palenque Chiapas, por el apoyo brindado para la búsqueda de los domicilios de las mujeres y sus niños positivos para la entrega del tratamiento.

Referencias

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Fechas de Publicación

  • Publicación en esta colección
    May-Jun 2016

Histórico

  • Recibido
    12 Ago 2015
  • Acepto
    26 Ene 2016
Instituto Nacional de Salud Pública Cuernavaca - Morelos - Mexico
E-mail: spm@insp3.insp.mx