• Polymerase chain reaction for rapid detection and serotyping of dengue viruses in clinical samples Artículos

    Rosario, Delfina; Álvarez, Mayling; Díaz, Javier; Contreras, Rodolfo; Rodríguez, Rosmari; Vázquez, Susana; Guzmán, María G.

    Abstract in Spanish:

    El trabajo que aquí se presenta describe las ventajas de usar la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RCP-TI) para detectar e identificar con rapidez virus del dengue en muestras clínicas. Se sometieron directamente a RCP-TI 27 muestras obtenidas de pacientes con fiebre de dengue y fiebre hemorrágica de dengue durante epidemias en Colombia, Nicaragua y Panamá. El ADN de cadena doble obtenido con la RCP-TI se identificó mediante una segunda amplificación (RCP de anidación) utilizando cebadores específicos para cada tipo de virus, aislamiento vírico e inmunofluorescencia indirecta (IFI) y con electroinmunoensayo enzimático detector de anticuerpos IgM contra el virus del dengue. El genoma vírico amplificado se detectó e identificó en un máximo de 8 horas. Los parámetros calculados para hacer el diagnóstico por RCP-TI, usando el aislamiento vírico y la IFI como estándar de oro, fueron una sensibilidad de 100%; una especificidad de 78%; un valor predictivo positivo de 69% y un valor predictivo negativo de 100%. Cabe notar que dos de los especímenes que dieron resultados positivos a la prueba de RCP-TI anidada y negativos al aislamiento vírico mostraron anticuerpos específicos de tipo IgM. Los resultados de la RCP-TI en general mostraron una estrecha concordancia con los del aislamiento vírico, lo cual sugiere que la RCP es un procedimiento que facilita enormemente el diagnóstico rápido y temprano del dengue.

    Abstract in English:

    This study describes the benefits of using reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for the rapid detection and typing of dengue virus in clinical samples. Twenty-seven serum specimens from patients with dengue fever and dengue hemorrhagic fever in Colombia, Nicaragua, and Panama were directly subjected to RT-PCR for the detection of dengue virus. The resulting double-stranded DNA product was typed by a second round of PCR amplification (nested PCR) with type specific primers, viral culture/indirect immunofluorescence (IIF), and enzyme-linked electroimmunoassay for IgM anti-dengue antibodies. The amplified virus genome was detected and typed within 8 hours. Nested RT-PCR, using viral culture and IIF as the gold standard, showed 100% sensitivity; 78% specificity; 69% positive predictive value, and 100% negative predictive value. It is noteworthy that two of the specimens whose results were positive with nested RT-PCR and negative with viral culture showed specific IgM antibodies. The results of the RT-PCR were in close agreement with those obtained through viral culture. This suggests PCR can greatly facilitate the rapid and early diagnosis of dengue infection.
  • Indications for episiotomy at public maternity clinics in Neuquén, Argentina Artículos

    Cravchik, amuel; Muñoz, Delia M. E.; Bortman, Marcelo

    Abstract in Spanish:

    Las indicaciones para realizar episiotomía en los partos vaginales es un tema controvertido que requere revisión en todas partes del mundo. En 1995, en la provincia de Neuquén, Argentina, se elaboraron normas para la atención del parto de bajo riesgo, una de las cuales recomendaba reservar la episiotomía para los casos de alto riesgo de desgarro. Este estudio de cohortes retrospectivo se diseñó con objeto de comparar los criterios que se utilizaron en 1996 como indicación de episiotomía en los centros de maternidad del subsector público de esa provincia así como el efecto de la paridad y otras variables en la frecuencia de esa intervención. Se examinaron 7 513 registros del Sistema Informático Perinatal, que representan 70% del total de partos atendidos ese año. Se excluyeron 830 correspondientes a partos por cesárea. Los 6683 registros restantes se dividieron en ocho grupos según la institución donde se atendió el parto. Se calcularon las tasas de incidencia de episiotomía en esos grupos y se realizó una regresión de Poisson a fin de ajustar las tasas por peso al nacer de los niños, paridad y edad de la madre, y forma de presentación y de terminación del parto. Tomando al Hospital Neuquén como base por ser el más complejo y atenderse allí el mayor número de partos, dos hospitales tuvieron incidencias de episiotomía correspondientes a 70% (IC95%, 62 a 79) y 67% (IC95%, 57 a 78) de las de ese hospital. Otros dos hospitales tuvieron incidencias más altas que el Neuquén por 28% (IC95%, 13 a 45) y 17% (IC95%, 2 a 35), mientras que en los hospitales restantes no se observaron diferencias significativas. Mediante regresión estratificada según el número de partos vaginales previos, se observó que la variable con mayor efecto en la indicación de episiotomía fue la paridad. En las nulíparas, las tasas no mostraron diferencias según el lugar donde se atendió el parto, pero en las primíparas sí hubo diferencia, aun más marcada en las multíparas. Se concluyó que todos los establecimientos incluidos en el estudio realizaban episiotomía casi de rutina en las parturientas nulíparas, que hay diferencias significativas en cuanto a su indicación en primíparas y que estas se incrementan con la paridad. Esas diferencias parecen indicar que en los centros de maternidad públicos de la provincia de Neuquén se están siguiendo distintos criterios en la indicación de episiotomía.

    Abstract in English:

    Indications for performing episiotomy during vaginal births are a controversial topic requiring worldwide review. In Neuquén Province, Argentina, when standards for low-risk childbirth were developed in 1995, they included the provision to limit episiotomies to cases at high risk for spontaneous laceration. The present retrospective cohort study was designed for comparing the criteria applied in 1996 as indications for episiotomy in public maternity services of Neuquén Province, as well as the effect of parity and other variables on its frequency. The Perinatal Data System yielded 7 513 medical records for review, which represented 70% of all the institutional births during the year. Of these records, 830 dealing with cesarean sections did not qualify for the study. The remaining 6 683 records were divided into eight groups according to hospital location. Episiotomy incidence rates were estimated for those eight groups and the Poisson regression was applied in order to adjust for birthweight, number of siblings, mother's age, and type of birth presentation and outcome. Taking the Neuquén Hospital data as baseline because of its higher complexity and large number of births taking place there, two hospitals had episiotomy incidence rates equal to 70% (95%CI: 62%79%) and 67% (95%CI: 57%78%) of the Neuquén Hospital rates. Two other hospitals had incidence rates which were higher by 28% (95%CI: 13%45%) and 17% (95%CI: 235%), while the remaining hospitals showed no significant differences. Stratified regression by number of previous vaginal births showed parity to be the strongest influencing variable on indications for episiotomy. Rates for nulliparous women showed no differences by hospital, but rates for primiparous women did, with even stronger differences shown for multiparous women. The authors concluded that all institutions included in the study performed episiotomies as a virtually routine procedure on nulliparous women, that there are significant differences in their indications for primiparous women, and that those differences increase along with parity. These differences seem to show that maternity clinics in the Province of Neuquén vary widely in their criteria for episiotomy indications.
  • Diagnosis of disseminated mycobacterial infection: testing a simple and inexpensive method for use in developing countries Artículos

    Fandinho, F. C .O.; Grinsztejn, B.; Veloso, V. G.; Lourenço, M. C. S.; Werneck-Barroso, E.; João, E.; Nogueira, S. A.; Fonseca, L. de S.

    Abstract in Spanish:

    Con el desarrollo de la epidemia del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida), el aislamiento de micobacterias de la sangre se ha convertido en un problema habitual de los laboratorios clínicos. En el presente estudio se evaluaron dos métodos para aislar micobacterias en muestras de sangre de pacientes de sida: 1) la inoculación directa en un medio bifásico y 2) un método no comercializado de lisis por centrifugación. A cada uno de los 50 pacientes de sida con sospecha de enfermedad micobacteriana diseminada se le extrajeron tres muestras de sangre consecutivas a intervalos de 15 minutos. En 70 de 138 muestras de sangre obtenidas de 30 (60%) pacientes se detectó crecimiento de micobacterias. A partir de estos cultivos, en 19 pacientes se aisló Mycobacterium tuberculosis y en 11 (37%), el complejo Mycobacterium avium. Los cultivos en que se utilizó el método de lisis por centrifugación fueron positivos en 54% de los pacientes, mientras que esta cifra se redujo a 44% en los cultivos en que se usó el método bifásico (P > 0,05). El porcentaje de muestras positivas al complejo M. avium fue mayor con el método de centrifugación por lisis (91%) que con el de inoculación directa en medio bifásico (45,4%) (P < 0,05). Sin embargo, los porcentajes de muestras positivas a M. tuberculosis detectadas con el método de lisis por centrifugación (89,5%) y con el de inoculación directa en un medio bifásico (100%) fueron similares (P > 0,05). La técnica no comercializada de centrifugación por lisis es barata, fiable y puede constituir un método alternativo para el diagnóstico de micobacteriemia en países en desarrollo.

    Abstract in English:

    With the development of the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) epidemic, the isolation of mycobacteria from blood has become a common problem for clinical laboratories. In this study two methods were used for the recovery of mycobacteria from blood specimens obtained from AIDS patients: (1) direct inoculation in biphasic medium, and (2) a noncommercial lysis-centrifugaton method. A total of three consecutive blood samples were taken at 15-minute intervals from each of 50 AIDS patients with clinical suspicion of disseminated mycobacterial disease. Mycobacterium growth was noted in 70/138 blood specimens from 30 (60%) patients. These cultures yielded Mycobacterium tuberculosis in 19 (63%) and Mycobacterium avium complex organisms in 11 (37%) patients. Cultures using the lysis-centrifugation method were positive in 54% of the patients, while cultures using biphasic medium were positive in 44% (P > 0,05). The positivity for M. avium complex was higher with lysis-centrifugation (91%) than with biphasic medium (45,4%) (P < 0,05). However, the positivities for M. tuberculosis with the lysis-centrifugation method (89,5%) and direct inoculation in biphasic medium (100%) were similar (P > 0,05). The use of a noncommercial lysis-centrifugation technique is inexpensive, reliable, and can be an alternative method for the diagnosis of mycobacteremia in developing countries.
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